这都可以dap(dapi染色)
10mM Tris-HCl 9mL +DAB +0.3% NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后
DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上一、DAB染色液的使用方法⒈DAB显色液配制10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后立即使用。
⒉显色准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤⒊加入适量的DAB显色液,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
⒋置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分 钟,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出现⒌用镊子夹起固相膜,放进无离子水里清洗 ⒍空气中晾干 ⒎拍照记录 二、DAB染色液的注意事项⒈DAB溶液应低温密封保存。
如有结晶析出,应确保结晶完全溶解再行使用;⒉显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;⒊DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染;
⒋DAB有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具欢迎访问中国微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!。
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- 编辑:李松一
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