血细胞计数板(血细胞计数板的计算方法)真没想到

1.精液 理学检验（一）精液理学检验程序将盛有完整的精液标本的容器置于37 ℃环境，待精液液化，30~60 min，评估并记录精液外观、精液量、黏稠度、液化时间、酸碱度、精子活力

 

1.精液  理学检验（一）精液理学检验程序将盛有完整的精液标本的容器置于37 ℃环境，待精液液化，30~60 min，评估并记录精液外观、精液量、黏稠度、液化时间、酸碱度、精子活力、精子数量、精子存活率、精子形态学、混合抗球蛋白反应试验、过氧化物酶试验、免疫珠试验或间接免疫珠试验、附属性腺标志物、病原微生物学检测等。

（二）精液理学检查内容理学检查包括精液外观、精液量、黏稠度、液化时间和酸碱度等1.精液外观：正常精液外观呈均质性、灰白色或乳白色，不透明精液呈棕色或红色，提示红细胞存在；黄色见于黄疸患者和服用维生素或药物者。

若存在大量白细胞，精液明显混浊、透明度降低，当精子密度很低时，精液近乎透明2.精液量：推荐称重法测量精液量，在接收到标本5 min内完成将收集标本的广口瓶预称重（重量标在瓶身和瓶盖上），直接将标本留取到改良的广口瓶后进行称重，减去瓶子重量，以1.01 g/ml的精液浓度计算精液量。

不推荐使用移液管、注射器和量筒测量精液体积正常一次射精量约为1.5~6.8 ml3. 黏稠度：精液完全液化后，使用Pausteur滴管法或玻棒法，观察拉丝长度正常精液形成不连续的小滴，拉丝长度小于2 cm，黏稠度异常或液体增厚时，拉丝长度大于2 cm。

根据液化和拉丝程度将精液黏稠度分为3级：（1）1级，30 min基本液化，呈黏稠丝状；（2）2级，60 min不液化，呈粗大黏稠丝；（3）3级，24 h不液化，黏稠性很高呈胶冻状4.液化时间：精液离体收集到容器后，通常在室温或37 ℃孵育箱内几分钟内开始液化，在15~30 min内完全液化，可进行后续检查。

超过30 min不液化，应在37 ℃孵育继续放置30 min，即60 min后进行后续检查超过60 min仍不能液化，则为异常，液化延迟或异常均应准确记录为液化异常样本，可借助机械混合［13］或添加消化酶

［14］等手段促进精液液化，方便后续检查的进行有时正常液化的精液标本含有不液化的胶冻状颗粒，无临床意义5.酸碱度：应在精液液化后测量，宜在30 min后进行推荐使用测量范围为6.0~10.0的pH试纸来测定酸碱度。

正常精液pH为7.2~8.0（平均为7.8），呈弱碱性pH<7.0并伴有精液量减少和精子数量减少，可能存在先天性双侧输精管缺如和胚胎因素［15, 16, 17, 18］精囊腺缺失或发育不良也可造成精液量减少和pH降低。

pH>8.0，见于前列腺、精囊腺、尿道球腺和附睾的炎症建议1：对于超过60 min仍不液化精液标本，可进行机械混合或添加酶消化剂，以便进行进一步分析对液化异常标本，应在报告中注明液化处理方式是机械混合还是使用酶消化剂。

2.精液  显微镜检查精液显微镜检查，或称精液有形成分分析，包括精子活动率、精子活动力、精子计数、精子形态分析和精子凝集现象检查及其他有形成分检查等，需采用标准化的操作和计数方能获得准确和可靠的结果（一）精子活动率

精子活动率是活动精子占精子总数的百分率射精30~60 min内精子活动率达到80%~90%活动率<40%，应进行精子活体染色，检查精子的存活率常用检测方法为伊红-苯胺黑染色法和低渗肿胀试验来鉴别细胞膜完整的精子，鉴别不动死精子和不动活精子，大量活而不动精子提示精子尾部结构缺陷；大量死精子提示附睾存在疾病或感染所致免疫反应。

［19］总精子数25%~30%为活而不动精子，提示为遗传性纤毛问题［20］（二）精子活动力精子活动力是评估男性生育能力的重要指标检测常用传统显微镜法、连续摄影法和精子质量分析法（1）显微镜法：传统镜检方法受检验者的主观影响因素较大；（2）连续摄影法：计算机视频显微照相术和实时显微照相术可客观评价精子的活动力和形态；（3）精子质量分析法：WHO推荐使用评估精子活力等级的简单系统。

精子质量分析仪具有操作便捷，准确、客观的特点，是较为理想的精子活力分析法WHO将精子活动力分为4级：（1）a级：精子快速向前运动，37 ℃，精子速度≥25 μm/s，或20 ℃，精子速度≥20 μm/s；（2）b级：慢速或呆滞地向前运动；（3）c级：非前向运动（精子速度<5 μm/s）；（4）d级：不动。

正常标本采集后60 min内，≥50%的精子呈中度或快速直线运动但生理情况下，射精后数分钟精子离开精液进入宫颈黏液，因此精子活动力评价的意义有限（三）精子计数精子计数包括精子密度和精子总数精液中精子浓度与受精率和妊娠率相关，一次射精，精子数达到（20~250）×10。

6/ml考虑为正常，减低或增高均可引起不育精子计数<20×106/ml为少精子症；精液多次检查无精子时称为无精子症WHO推荐血细胞计数板法进行精子计数，也可采用精子专用计数板法健康人的精子数量存在着明显的个体差异，同一个体的精子数量变化范围也很大，受禁欲时间、病毒感染和精神压力等因素影响。

（四）精子形态分析精子形态分析采用计算机技术客观的评价精子头部长度、宽度、周长和面积，但尚无公认的正常参考区间严格来讲，只有头、颈、中段和尾部都正常的精子才能称为正常精子正常精子头部成椭圆形，长度4.0~5.0 μm，宽度2.5~3.5 μm，顶体界限清楚，占头部40%~70%；中段细，长度6~8 μm，宽度不超过1 μm；尾部长度至少45 μm，细长无卷曲。

精子头部出现明显畸形、缺陷或不规则、空泡，颈部和尾部出现双尾、断裂、弯折等，均可判定为异常精子简单的形态学评价将精子分为正常和异常两类若进行全面详细形态学评价，可将精子分为5类：正常、头部缺陷、颈部和中段缺陷、尾部缺陷、胞质小滴（位于精子中段，该区域大于正常精子头部的1/3）。

WHO推荐使用巴氏染色法进行精子形态分析，也可使用Shorr染色法或Diff-Quik快速染色法，但需要与标准方法进行比对和验证生育力正常男性中，正常形态精子比例应超过50%，低于5%，多提示不育生育者正常形态精子多超过12%~15%，且生育组和不育组相比，精子头部长度和宽度比率差异有统计学意义。

不推荐使用湿片法精子形态检查，染色法虽然操作相对复杂，但染色后精子形态易于辨认，结果准确性和重复性较好（五）精子凝集现象检查精子凝集时活动精子以各种方式（如头对头，尾对尾或混合型）相互黏附在一起的现象以分级方式报告。

（1）1级：零散的，每个凝集<10个精子，有很多自由活动的精子；（2）2级：中等的，每个凝集50个精子，仍有一些活动的精子；（4）4级：全部的，所有精子凝集，数个凝集又粘连在一起。

此外，也可以采用“-”（无凝集）~“3+”（所有可动精子凝集在一起）的形式报告精子凝集现象的存在提示存在抗精子抗体，免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白A（IgA）抗体与免疫学不育有密切联系，但需进一步实验证明，如免疫珠试验、混合抗人球蛋白试验来鉴别抗体种类。

单凭此现象不足以推断免疫因素介导的不育症（六）精液中其他有形成分检查正常精液中除精子外，还会出现其他细胞，如尿路上皮细胞、白细胞、未成熟生精细胞，以及细胞碎片和各种颗粒因这些细胞大小和细胞核形状类似，存在鉴别困难。

WHO推荐采用过氧化物酶染色来识别白细胞（过氧化物酶阳性）、生精细胞、淋巴细胞（过氧化物酶阴性），从而鉴别感染和不育症此外，精液过氧化物酶常规检查可作为基础的筛查手段［21］白细胞还可以借助免疫细胞化学检查进一步区分为正常白细胞和携带精子抗原白细胞。

过氧化物酶阳性细胞≥1×106/ml，认为精液白细胞总数存在异常，与感染和精子质量降低存在关联白细胞可以通过氧自由基攻击影响精子活动力和DNA完整性而白细胞渗透能够对精子造成损伤依赖于一些无法从精液标本获得的信息，如渗透的时间和解剖学定位以及白细胞本身性质和是否处于激活状态。

多形核白细胞会释放胞内颗粒，而其他类型白细胞，如淋巴细胞、巨噬细胞或单核细胞胞内不含过氧化物酶，不能被邻甲苯胺染色，但可通过免疫细胞化学途径实现免疫细胞化学染色法与中性粒细胞过氧化物酶活性评估相比，价格昂贵，较为费时，但可区分白细胞和精原细胞。

临床实验室可使用全白细胞抗体CD45+单克隆抗体对精浆中的细胞进行染色以区分白细胞和生殖细胞目前尚无生育能力正常男性人群精浆中CD45+细胞浓度参考值，但普遍认为过氧化物酶阳性细胞>1.0×106/ml，提示精浆中白细胞总数较高。

建议2：精子活动力检查是通过评估精子细胞膜的完整性，常规地确定所有精子的生命力，但在总活动率为40%以上时，不建议进行此项检查建议3：精子形态学检查首选巴氏染色法，也可使用Shorr染色法或Diff-Quik快速染色法。

临床实验室必须建立本实验室标准操作方法和精子形态判断标准，不推荐采用湿片镜检法进行精子形态学检查建议4：精子凝集现象提示存在抗精子抗体，但单凭此现象不足以推断免疫因素介导的不育症，需进一步进行相关实验室检查。

文章来源：《临床实验室精液常规检验中国专家共识》中华检验医学杂志, 2022,45(8) : 802-812请把这篇文章转给所有人看到