神勇小白鼠(神勇小白鼠图片)不看后悔
**3.接种方式:**接种前用枪将细胞悬液充分的吹散,防止细胞成团而降低细胞成活率;接种时,针头在皮下进针深一点,约1cm深,减少注射后细胞悬液
带我走好吗?看在我这么萌的份上~
我的梦想是成为一名音乐家!
只爱粉色,伦家是公主~然而有一这样群小白鼠,不靠自己萌翻天的外表,大爱无疆,英勇献身终身奋斗在“实验室”这个战场上科研路漫漫,让我们一路作伴!小步骤上麻烦不断?实验进入死循环、、追求完美,却还是出现不优美的小问题、、
每天实验技能多一点~今日开讲《裸鼠成瘤模型》!裸鼠成瘤模型由于裸鼠的免疫缺陷,在一定情况下,不排斥来自异种动物的组织移植,因此,可用其建立理想的人类肿瘤可移植实验动物肿瘤模型。
实验步骤1.细胞复苏从液氮中取出冻存的U87-MG细胞,迅速放入37℃水浴箱中,快速融化,加入含10%胎牛血清的DMEM/High培养基,接种于T25 培养瓶中,37℃,5%CO2孵箱常规培养传代2.细胞传代培养
弃培养瓶中旧培养液,用无菌PBS冲洗两遍,将胰蛋白酶-EDTA 1 ml加入到培养瓶中消化细胞,倒置相差显微镜下观察,待镜下细胞出现筛网状空隙时倒掉胰酶,加入含10%胎牛血清的DMEM/High培养基至覆盖培养瓶底,移液管反复吹打,使细胞悬浮,将细胞悬液移入离心管中1000r/min离心5min,弃上清液,按1:2~1:4传代,在37℃、5%CO2孵箱进行培养,2~3天换液,选择对数期的细胞用于实验。
3.接种制备加入无菌PBS,轻轻吹打细胞沉淀,混匀成细胞悬液,细胞计数,使细胞密度达到 1×107个/ml;在超净台中,用75%酒精消毒裸鼠背部,于皮下(大部分选择腋下接种)注射0.1 ml细胞悬液4.结果观察
一般接种7-10天左右可以见到皮下开始出现肿块注意事项1.接种细胞的选择:取处于对数生长期的细胞细胞的状态是成瘤实验的关键,细胞达80-90%左右密度为宜细胞消化后应尽快接种到裸鼠皮下,一般尽量在半小时内完成,途中将细胞悬液放在冰上降低细胞的代谢。
2.裸鼠的选择:选择的裸鼠一般在5-8周龄,体重18-20g左右;种植部位选择血供丰富区域,如腋窝中后部、腹股沟中上部;左手拇指和食指捏紧裸鼠颈背部皮肤,小拇指夹住裸鼠尾巴进行保定3.接种方式:接种前用枪将细胞悬液充分的吹散,防止细胞成团而降低细胞成活率;接种时,针头在皮下进针深一点,约1cm深,减少注射后细胞悬液从针眼溢出。
4.结果判定:肿瘤大小测量一般为1周两次,用游标卡尺测量瘤体最长径(a)和最短径(b),按公式计算肿瘤体积(V)的大小,V(mm3)=1/6πab²东澳服务服务项目可包含裸鼠的购买、饲养、造模、取材及后续指标的检测等。
实验流程裸鼠饲养→细胞培养→模型制备→结果判定示例
- 标签:
- 编辑:李松一
- 相关文章
-
奔驰s500价格(奔驰s500价格2016年)快来看
这款奔驰s500是06年一月份上牌,至今跑了18w公里,不知道车商有没有调表,车子左侧翼子板换过,左…
-
杂货船(杂货船在货舱区设置两层以上的甲板)速看
来源:海合网公众号船体是船舶的基本部分,可分为主体部分和上层建筑部分。船体结构大都用钢材,由板材和型材组合成板架结构。…
- gspot(Gspot狂暴熊)学到了吗
- 火影忍者531(火影忍者免费观看720集)万万没想到
- 沈阳二中中加班(沈阳二中中加班多少分)这样也行?
- 广州到上海火车时刻表(广州到上海动车时刻表查询)真没想到
- 九朝贡胶(九朝贡胶是什么)全程干货